1. 項目背景    

摘自《大便隱血（FOB）檢測試劑盒（膠體金免疫層析法）注冊審查指導(dǎo)原則（2024年修訂版）》    

大便隱血（FOB）（亦稱大便潛血）是指消化道少量出血，紅細(xì)胞被消化破壞，糞便外觀無異常改變，肉眼和顯微鏡下均不能證實的出血。在臨床消化道惡性腫瘤早期20%的患者可出現(xiàn)隱血試驗陽性,晚期病人的隱血陽性率可達(dá)到90%以上，并且可呈持續(xù)性陽性；消化道出血，消化道潰瘍病人糞便隱血試驗多呈間斷性陽性；痢疾，直腸息肉、痔瘡出血等也可使糞便中出現(xiàn)較多紅細(xì)胞，導(dǎo)致隱血試驗陽性。因此，大便隱血檢查可作為檢測各種原因所致的消化道出血的重要檢測試驗，是較為有效的方法，目前臨床檢查大便隱血主要有膠體金免疫層析法、化學(xué)法、彩色乳膠免疫層析及熒光免疫層析法等。

2. 測試方案及性能表現(xiàn)    

針對大便隱血（FOB）的檢測，西寶生物推出4種單克隆抗體和1種重組抗原，適合膠體金免疫層析、彩色乳膠免疫層析及熒光免疫層析平臺。具體性能如下。

（以下評估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行抗體交叉配對驗證）。     

2.1膠體金免疫層析平臺    

2.1.1 抗體配對組合1：便隱血（FOB）單抗（貨號：EKY0069G）標(biāo)記膠體金+便隱血（FOB）單抗（貨號：EKY0069H）劃膜；    

2.1.2 便隱血（FOB）高值質(zhì)控品≥10g/L（貨號：EEI0054A）用合適的稀釋液按照理論濃度依次稀釋到200ug/mL、20ug/mL、2ug/mL、0.2ug/mL、0.02ug/mL。

2.1.3 反應(yīng)模式：10uL樣品+100uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應(yīng)時間15min-20min；

2.1.4 實驗結(jié)果：在膠體金免疫層析平臺，采用此抗體配對組合1測試便隱血（FOB）質(zhì)控品稀釋梯度均顯色，靈敏度可達(dá)0.02ug/mL。該實驗結(jié)果表明此抗體配對在膠體金層析平臺測試性能良好。

膠體金層析平臺測試示意圖    

2.2彩色乳膠免疫層析平臺    

2.2.1 抗體配對組合2：便隱血（FOB）單抗（貨號：EKY0069H）標(biāo)記彩色乳膠+便隱血（FOB）單抗（貨號：EKY0069G）劃膜；

2.2.2 便隱血（FOB）高值質(zhì)控品≥10g/L（貨號：EEI0054A）用合適的稀釋液按照理論濃度依次稀釋到200ug/mL、20ug/mL、2ug/mL、0.2ug/mL、0.02ug/mL。

2.2.3 反應(yīng)模式：10uL樣品+100uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應(yīng)時間15min-20min；

2.2.4 實驗結(jié)果：在彩色乳膠免疫層析平臺，采用此抗體配對組合2測試便隱血（FOB）質(zhì)控品稀釋梯度均顯色，靈敏度可達(dá)0.02ug/mL。表明此抗體配對在彩色乳膠免疫層析平臺測試性能良好。

彩色乳膠層析平臺測試示意圖    

2.3熒光免疫層析平臺    

2.3.1 抗體配對組合3：便隱血（FOB）單抗（貨號：EKY0069B）標(biāo)記熒光微球+便隱血（FOB）單抗（貨號：EKY0069C）劃膜；

2.3.2 抗體配對組合4：便隱血（FOB）單抗（貨號：EKY0069C）標(biāo)記熒光微球+便隱血（FOB）單抗（貨號：EKY0069B）劃膜；

2.3.3 便隱血（FOB）高值質(zhì)控品≥10g/L（貨號：EEI0054A）用合適的稀釋液按照理論濃度依次稀釋到200ug/mL、20ug/mL、2ug/mL、0.2ug/mL、0.02ug/mL。

2.3.4 反應(yīng)模式：10uL樣品+100uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應(yīng)時間15min-20min；

2.3.5 實驗結(jié)果：在熒光免疫層析平臺，采用此抗體配對組合3及組合4測試便隱血（FOB）質(zhì)控品稀釋梯度靈敏度可達(dá)0.02ug/mL（如表1及表2實驗數(shù)據(jù)所示）。表明此抗體配對在熒光免疫層析平臺測試性能良好。

表1 FOB抗體配對組合3測試數(shù)據(jù)

表2 FOB抗體配對組合4測試數(shù)據(jù)

測試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。    

3.產(chǎn)品信息