核酸酶S7是一種核酸內切酶，主要切割單鏈底物。它還切割雙鏈DNA或RNA。它切割RNA和DNA的5′磷酸二酯鍵，產生3′-單核苷酸和寡核苷酸。酶的活性取決于Ca2+ ，添加EDTA可使酶滅活。相比于DNA上的GC，核酸酶S7切割對富含AT的區域高度特異。

核酸酶S7已用于核糖體分析的核糖核酸酶選擇過程研究。