E. coli Poly(A) Polymerase

  • 別名：加尾酶
  • 編碼：ECE0567B
  • 級(jí)別：GMP Grade
  • 簡(jiǎn)介：通過(guò)加尾酶在mRNA 3' 末端引入Poly A尾，可增加mRNA的穩(wěn)定性，增加mRNA翻譯效率。使用加尾酶引入的Poly A尾的優(yōu)勢(shì)是簡(jiǎn)便易行，避免在質(zhì)粒構(gòu)建時(shí)引入過(guò)多的連續(xù)T堿基造成的質(zhì)粒不穩(wěn)定等問(wèn)題。
品牌 貨號(hào) 包裝規(guī)格 庫(kù)存 價(jià)格 數(shù)量
Seebio ECE0567B-100U 100U 有 面議
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Seebio ECE0567B-500U 500U 有 面議
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試用申請(qǐng) 大包裝定制

基礎(chǔ)信息

來(lái)源大腸桿菌大規(guī)模發(fā)酵表達(dá)
級(jí)別GMP Grade
應(yīng)用克隆或親和純化

產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品描述:
通過(guò)加尾酶在mRNA 3' 末端引入Poly A尾，可增加mRNA的穩(wěn)定性，增加mRNA翻譯效率。使用加尾酶引入的Poly A尾的優(yōu)勢(shì)是簡(jiǎn)便易行，避免在質(zhì)粒構(gòu)建時(shí)引入過(guò)多的連續(xù)T堿基造成的質(zhì)粒不穩(wěn)定等問(wèn)題。
E. coli Poly (A) Polymerase 不依賴模板的存在，可以催化 ATP 以 AMP 的形式依次摻入到 RNA 的 3′末端，即在 RNA 的 3′末端加多聚 A 尾。Poly (A) 聚合酶具有很高的加尾效率，可以在 RNA 的 3′末端加入 20~200 個(gè) A 堿基。Poly (A)結(jié)構(gòu)有助于提高 mRNA 的翻譯效率。
本制品利用大腸桿菌大規(guī)模發(fā)酵表達(dá)，采用藥用規(guī)格原輔料生產(chǎn)，并嚴(yán)格控制宿主蛋白質(zhì)殘留、核酸殘留等，符合 GMP 規(guī)范的產(chǎn)品生產(chǎn)與質(zhì)量管理規(guī)程保障生產(chǎn)過(guò)程及所有原輔料可追溯。
遵循以下規(guī)范生產(chǎn)：

ISO 9001:2015, certified facility
USP Chapter <1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products
USP Chapter <92>, Growth Factors and Cytokines Used in Cell Therapy Manufacturing
Ph. Eur. General Chapter 5.2.12, Raw Materials of Biological Origin for the Production of Cell-based and Gene Therapy Medicinal Products

產(chǎn)品用途：
1.  用于 RNA 3′末端標(biāo)記。
2.  為 RNA 添加 Poly(A)尾，用于克隆或親和純化。比如將 miRNA 添加 Poly (A)，為 cDNA 合成提供 oligo-dT 引物結(jié)合位點(diǎn)。
3.  提高 RNA 在真核細(xì)胞中的翻譯效率。
活性定義：
在 37℃條件下，10 min 內(nèi)將1 nmol AMP 摻入到 RNA 所需的酶量定義為 1 個(gè)活性單位（U）。 
保存體系：
20mM Tris-HCl; 300mM NaCl; 1mM DTT; 1mM EDTA; 0.1%TritonX-100; 50% (v/v) Glycerol, pH7.5。 
保存溫度：
-20±5 ℃。
注意事項(xiàng)：
1. 熱失活條件：65℃，20 min。
2. 該酶只能以 RNA 為底物。
3. 該酶將 AMP 添加到 RNA 的3′末端具有較高的選擇性，并不會(huì)在所有 RNA 分子中添加相同長(zhǎng)度的 Poly (A)。
4. 該酶使用 M-MuLV 逆轉(zhuǎn)錄酶反應(yīng)緩沖液，也可以進(jìn)行反應(yīng)。
5. 該酶需要 Mg2+等二價(jià)陽(yáng)離子才具有活性。
6. RNA 加 A 尾長(zhǎng)度受酶量、ATP 和反應(yīng)時(shí)間等因素影響，不同的實(shí)驗(yàn)需要加 A 的量會(huì)有所不同，可通過(guò)減少反應(yīng)時(shí)間來(lái)調(diào)整加 A 的長(zhǎng)度，該酶在 37°C 反應(yīng) 30 分鐘時(shí)可加約 30 個(gè) A 堿基，1 小時(shí)可加約 100 個(gè) A 堿基。
7. EDTA 抑制該酶活性。若停止反應(yīng)，可通過(guò)添加 EDTA 至終濃度 10mM，或直接對(duì)其進(jìn)行純化。


質(zhì)量指標(biāo)

MSDS

相關(guān)資料

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