體外方法的優點是可以將功能性抗體片段的克隆、選擇以及陽性抗體編碼基因的分離結合?？梢赃x擇具有高通量潛能的抗體，并根據需要精確定制抗體親和力和特異性。噬菌體和酵母展示技術是常見的展示方法?？贵w展示文庫是這一概念較成功的應用。
西寶生物目前開發的噬菌體展示技術服務平臺涵蓋了免疫抗體庫、天然抗體庫等常用的文庫類型，可根據客戶的特殊需求定制個性化文庫，并提供靈活有效的篩選服務。
噬菌體展示技術路線
將噬菌體展示文庫作為可溶相，而將與欲選擇的重組基因產物有特異性親和力的靶分子固定在一個固相載體上，洗去不能與固定相特異結合的文庫的大部分成員，將特異結合的成員洗脫下來，再進一步擴增，進入下一輪淘選。
全人源抗體庫構建流程（圖片來源于網絡）
常用的噬菌體
溶源性的單鏈絲狀噬菌體(如M13、f1和fd)
服務內容
服務描述 | 服務周期 | |
cDNA 合成 | 免疫細胞收集，總RNA提取，反轉錄合成cDNA。 | 1周 |
質粒構建 | 以以上cDNA為模板, PCR擴增抗體基因片段，并連接至載體 (例如：pComb3或pCANTAB5e載體) 。 | 4周 |
轉化 | 將已構建好的載體電轉化至大腸桿菌菌株。 | 1周 |
庫容鑒定 | (1)以上轉化菌株復蘇后，梯度稀釋，并涂布平板，計算陽性克隆數； (2)挑選10個陽性單克隆，提取質粒后，進行酶切驗證; (3)通過陽性克隆數和酶切驗證的結果，計算抗體庫庫容。 | |
抗體庫生產 | 通過輔助噬菌粒拯救獲得噬菌體展示抗體庫。 | 1周 |
服務信息
郵箱: market@seebio.cn
電話: 400-021-8158
