酵母菌發(fā)酵是較經(jīng)濟的真核表達系統(tǒng)，可大規(guī)模生產(chǎn)需要翻譯后修飾的分泌蛋白和細胞內(nèi)蛋白，包括人源化抗體。發(fā)酵和表達服務，自有的酵母發(fā)酵技術，集高產(chǎn)量、有效和類似哺乳動物表達系統(tǒng)的特點為一體，蛋白表達持久、穩(wěn)定。
服務特點
- g級蛋白生產(chǎn)： 適用于工業(yè)酶的定制生產(chǎn)。
- 高產(chǎn)量： 與大腸桿菌相比，蛋白產(chǎn)量增加2倍；酵母發(fā)酵產(chǎn)量5~10g/L。
- 穩(wěn)定生產(chǎn)工藝： 目的蛋白表達元件被整合到基因組中，形成穩(wěn)定的蛋白表達過程。
酵母表達純化服務詳情
客戶提供 | 步驟 | 詳情 | 周期 | 交付標準 |
目的序列（DNA或蛋白）/DNA模板/表達載體 | 基因合成和亞克隆（可選） | ·亞克隆至適當?shù)谋磉_載體中 ·質(zhì)粒大抽·構建線性化載體 | 2周 | 載體構建報告 |
表達和評估 | ·將線性載體轉化至適合的宿主 ·通過PCR方法確定陽性轉化株 ·表達確認 ·SDS-PAGE和/或Western blot | 2周 | 表達報告 | |
1L表達和純化 | ·1L酵母培養(yǎng)表達 ·一步純化或多步純化達到≥90%純度 ·*QC檢測，包括SDS-PAGE、Western blot和LC-MS/MS覆蓋率檢測 | 2周 | ·純化的蛋白 ·QC報告 | |
放大生產(chǎn)和純化（可選） | ·至多2,000L的大規(guī)模生產(chǎn)（使用發(fā)酵罐以及TFF大規(guī)模過濾系統(tǒng)） ·交付的蛋白純度高達90%及以上 ·標簽去除 | 2-3 周 | ·酵母胞漿/已純化的蛋白 ·QC報告 |
* QC：SDS-PAGE用于檢測純度；BCA或Bradford用于檢測蛋白濃度；使用Anti-His和Anti-GST進行Western blot檢測蛋白純度（可選）；LC-MS/MS覆蓋率檢測用于確定目的蛋白（可選）。
如果不需要下游蛋白純化的酵母發(fā)酵服務，請從下表選擇靈活規(guī)模的酵母發(fā)酵服務。
酵母發(fā)酵服務詳情
客戶提供 | 發(fā)酵體積 | 周期 | 交付標準 | 類型 |
·目的序列 ·DNA/表達載體 ·甘油菌 ·微生物生長平板 | 5L | 1~2周 | ·酵母胞漿 ·批次記錄 ·QC數(shù)據(jù)表 | 可選： ·正常發(fā)酵 ·高密度發(fā)酵 |
10L | ||||
20L | ||||
50L | ||||
100L | 2~3周 | |||
200L | ||||
300L | ||||
500L | 3~4周 |
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